用高效液相色谱法测定Hb的含量,最后计算HbA1c占总Hb的百分含量。目前的免疫化学实验不仅检测HbA1c,也检测HbA2c;高浓度样本检测结果偏低,这与抗体浓度不能达到相关高度有关,需要解释。同时,免疫比浊法易受脂肪血、黄疸等样本因素影响,抗交叉污染较差,而且要求血红蛋白在一定范围之间才能达到较好的线性。
2.高效液相色谱法检测糖化血红蛋白的先进性 HbA1a、 HbA1b、HbA1Lc、HbA1Sc 、HbA0、HbF等电点不同,在弱酸性条件下所带电荷性质与数量存在差异, 与离子交换树脂的吸附和交换能力不同而分离。采用两种不同pH和离子强度的洗脱液(洗脱液A、洗脱液B),可将HbA1a、 HbA1b、HbA1Lc、HbA1Sc 、HbA0、HbF分别洗脱并检测,从而计算HbA1c在总Hb中所占的百分比。比免疫反应检测糖化血红蛋白准确性更高。
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